在實(shí)驗(yàn)室批量樣品處理工作中,12 道移液器是常用的移液器具,多通道同步移液的工作模式能夠提升樣品處理效率,但在長期使用過程中,移液誤差偏大的現(xiàn)象時(shí)常出現(xiàn)。誤差會(huì)直接干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可信度。想要解決該問題,需要從設(shè)備硬件狀態(tài)、耗材匹配、人員操作等多個(gè)方面開展排查,重點(diǎn)針對(duì)密封老化問題與操作手法帶來的干擾制定對(duì)應(yīng)的處理辦法,逐步還原移液器正常的移液性能。
開展誤差排查工作時(shí),應(yīng)當(dāng)遵循由外到內(nèi)、由簡單到復(fù)雜的順序,先排除環(huán)境與耗材帶來的影響,再檢查設(shè)備本體狀態(tài),最后核對(duì)操作流程。首先需要確認(rèn)實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件,環(huán)境溫度發(fā)生波動(dòng),會(huì)改變液體體積,也會(huì)對(duì)移液器內(nèi)部構(gòu)件產(chǎn)生影響,實(shí)驗(yàn)操作盡量保持環(huán)境溫度穩(wěn)定,避免移液器長時(shí)間放置在溫度變化明顯的區(qū)域。同時(shí)檢查移液槍頭的適配情況,槍頭與移液器吸頭座匹配度不足,會(huì)出現(xiàn)裝配松動(dòng)、貼合不緊密的情況,造成移液過程出現(xiàn)漏液,引發(fā)移液數(shù)值偏差。選用規(guī)格不匹配的槍頭,會(huì)進(jìn)一步放大移液誤差,更換適配的原廠槍頭后,觀察移液狀態(tài)是否得到改善。
完成耗材與環(huán)境排查后,重點(diǎn)排查密封部件老化問題。12 道移液器依靠內(nèi)部密封組件實(shí)現(xiàn)腔體密閉,依靠密封效果完成液體的吸入與排出。經(jīng)過反復(fù)按壓、長期接觸各類試劑,密封圈會(huì)出現(xiàn)磨損、變硬、開裂、變形等老化現(xiàn)象。密封出現(xiàn)問題之后,通道內(nèi)部無法維持穩(wěn)定負(fù)壓,吸液階段會(huì)出現(xiàn)吸液量不足,排液階段會(huì)出現(xiàn)液體殘留,各個(gè)通道之間移液量出現(xiàn)不一致,整體移液誤差上升。
判斷密封是否老化,可以進(jìn)行簡易的靜態(tài)檢漏測(cè)試。將移液器裝配好槍頭,吸取一定體積液體,保持豎直狀態(tài)靜置片刻,觀察槍頭端口是否有液體緩慢滴落。如果出現(xiàn)滴液現(xiàn)象,說明密封性能下降。部分移液器個(gè)別通道出現(xiàn)漏液,其余通道狀態(tài)正常,也屬于密封老化的典型表現(xiàn)。針對(duì)密封老化的處理,不可繼續(xù)帶病使用移液器。可以拆卸移液器對(duì)應(yīng)通道,更換全新的密封圈,更換過程中保持部件潔凈,不要沾染灰塵、試劑殘留。更換完成后,需要對(duì)移液器進(jìn)行試移液,確認(rèn)各個(gè)通道不再出現(xiàn)漏液情況。日常使用中,盡量避免移液器吸取具有腐蝕性、強(qiáng)有機(jī)溶劑類液體,這類試劑會(huì)加速密封件損耗,接觸腐蝕性液體后,需要及時(shí)對(duì)移液器內(nèi)部進(jìn)行清潔養(yǎng)護(hù),延緩密封部件老化速度。
除硬件密封問題以外,操作手法帶來的干擾,也是造成 12 道移液器移液誤差偏大的常見因素,很多時(shí)候設(shè)備硬件完好,卻因?yàn)椴僮髁?xí)慣問題產(chǎn)生偏差。第一是按壓檔位把控不到位,移液器分為吸液檔位與排液檔位,部分操作人員操作時(shí)直接按壓至第二檔完成吸液,會(huì)造成吸入液體體積超出預(yù)設(shè)數(shù)值。正確做法是吸液時(shí)按壓至第一檔位,松開推桿完成吸液,排液時(shí)按壓至第一檔,再繼續(xù)下壓完成殘留液體排出。第二是移液時(shí)槍頭浸入液體深度不當(dāng),槍頭浸入過深,會(huì)帶入額外液體;浸入過淺,容易吸入空氣,造成吸液量不足。操作時(shí)槍頭jian端浸入液面下少量即可,保持移液器豎直,不要傾斜角度過大。
第三是吸排液的速度把控,快速按壓釋放推桿,會(huì)造成液體產(chǎn)生氣泡,氣泡留存槍頭內(nèi)部,直接改變實(shí)際移液體積。操作過程中推桿下壓、回彈都需要保持平緩,避免動(dòng)作過快產(chǎn)生氣泡。第四是移液器放置方式不當(dāng),操作間隙將移液器平放,槍頭內(nèi)殘留液體容易回流進(jìn)入移液器內(nèi)部,腐蝕內(nèi)部密封構(gòu)件,同時(shí)也會(huì)造成下一次移液出現(xiàn)誤差,不用的時(shí)候應(yīng)當(dāng)將移液器豎直懸掛放置。
還有部分人員在移液完成后,直接將槍頭用力甩落,劇烈震動(dòng)會(huì)造成移液器內(nèi)部構(gòu)件位置偏移,間接放大移液誤差,卸除槍頭應(yīng)當(dāng)使用槍頭彈射裝置,不要用力磕碰槍頭座。
完成硬件檢修與操作習(xí)慣調(diào)整之后,需要開展驗(yàn)證工作。選取合適的液體,多次重復(fù)移液操作,對(duì)比各通道移液結(jié)果,觀察誤差是否回落。在日常工作中,也要做好定期維護(hù),定時(shí)檢查密封組件狀態(tài),規(guī)范操作流程,減少因?yàn)橛布p耗與人為操作帶來的移液偏差,保障批量移液工作可以穩(wěn)定開展。